Tirtsepatidi epäpuhtaudet

Tirtsepatidi epäpuhtaudet|Tilpeptidi epäpuhtauksien hallinta|Epäpuhtauksien mukautetun synteesin ja rakenteen vahvistus|Tiede{0}}peptidi

Tirzepatidi-epäpuhtauksien hallinta - GLP-1/GIP-kaksois-tavoitelääkkeen laatututkimukselle, geneeriselle lääkeraportoinnille.Science-Peptidi tarjoaa mukautetun synteesin tilpeptideihin liittyvistä epäpuhtauksista, mukaan lukien deleetiopeptidit, hapettuneet rakenteelliset epäpuhtaudet, rasvahappojen kuorintatuotteet jne. Tuemme puhdistuksen vahvistamiseen liittyviä tietojasi, dimerointia varten. spektroskopiatutkimus rakenteellisten vahvistustietojen kera. Tervetuloa ottamaan yhteyttä.

Tirzepatidi (Tirzepatidi) on GLP-1/GIP-kaksoisagonisti, jonka Eli Lilly keksi, ja se on ollut täydessä vauhdissa näiden kahden vuoden aikana. Sillä on hyvä sokeria alentava ja voimakas painoa alentava vaikutus, ja sitä kutsutaan päivitetyksi versioksi "painonpudotuksen ihmelääkkeestä". Kotimaiset valmistajat geneeristen peptidien lääkkeitä, monet tuijottavat sitä - patentin päättymisen jälkeen, kuka voi ensin käydä läpi tutkimuksen laadun, jolla on mahdollisuus napata ensimmäinen geneerinen.

 

Tilpeptidin laatua ei kuitenkaan ole niin helppo tutkia. Se on monimutkaisempi kuin simetikoni, ja siinä on 39 aminohappoa, rasvahapposivuketju (eikosaanidihappo) ja linkkeri. Epäpuhtaudet, joita saattaa ilmaantua synteesiprosessin aikana, ovat paljon suurempia kuin tavallisissa peptideissä. Puuttuvat peptidit, oksidatiiviset epäpuhtaudet, rasvahappoja erittävät tuotteet, dimeerit, linkkeriin liittyvät epäpuhtaudet on jokaisen oltava hallinnassa ja jokaisen on oltava kirkasta.

 

Meillä on paljon kokemusta monimutkaisten peptidiepäpuhtauksien synteesistä. Olemme erikoistuneet tilpeptidin tutkimukseen ja tiedämme, mitkä ovat sen epäpuhtausprofiilin vaikeudet ja mitkä ovat välttämättömät kontrollikohteet. Voimme räätälöidä erilaisten tilpeptidien epäpuhtauskontrollien synteesiä tarpeidesi mukaan rakenteen vahvistustiedoilla ja auttaa sinua määrittämään menetelmän niin, että sinulle ei todennäköisesti myönnetä täydennystä hakemuksen yhteydessä.

Tilpeptidin molekyylirakenne määrää, että sen epäpuhtausprofiili on paljon monimutkaisempi kuin yleisillä peptideillä. Kun teemme epäpuhtaustutkimuksia, keskitymme pääasiassa seuraaviin luokkiin:

Peptidi puuttuu
39 aminohappoa, joista yksi puuttuu synteesiprosessin aikana, ovat epäpuhtauksia. Puuttuvien peptidien retentioajat HPLC:ssä jakautuivat laajasti, ja puuttuvien peptidien polaarisuus oli erilainen eri asemissa. Osa puuttuu N-päästä, osa keskeltä ja osa läheltä rasvahappojen kiinnityskohtaa. Olemme saaneet asiakkaalta tilauksen 15 puuttuvasta peptidistä eri paikoissa paikallistaaksemme kaikki mahdolliset puuttuvat epäpuhtaudet niiden prosessissa.

Hapettavat epäpuhtaudet
Met tilpeptidin sekvenssissä on herkkä hapettumiselle sulfoksidiksi ja sitten sulfoniksi. Hapetuneet epäpuhtaudet ilmenevät usein stabiilisuustutkimuksissa ja kasvavat tietyn ajan kuluttua. Olemme tehneet vertailun, kiihdytetyissä olosuhteissa kuukauden ajan hapettumishuippu voi kasvaa yli 0,3 prosenttiin ilman hallintaa.

Rasvahappoja poistavat tuotteet
Tämä on tilpeptidille ainutlaatuinen epäpuhtaus. Sen rasvahapposivuketju (eikosaanidihappo) on kiinnittynyt lysiiniin linkkerin kautta, ja tämä modifikaatio voi osittain irrota synteesin tai varastoinnin aikana, jolloin rasvahappo-poistaa epäpuhtauksia. Ongelmallisempaa on, että irtoaminen voi tapahtua eri paikoissa - rasvahapon ja linkkerin välillä tai linkkerin ja peptidin - välillä, mikä johtaa erilaisiin epäpuhtauksiin. Olemme syntetisoineet asiakkaillemme useita rasvahappoihin{6}} liittyviä epäpuhtauksia, jotka vaihtelevat täydellisestä irtoamisesta vain pieneen osaan.

Dimeerit/polymeerit
Kaksi tai useampi tilpeptidimolekyyli klusteroituu yhteen muodostaen dimeerin tai korkeamman. Dimeerin molekyylipaino on kaksinkertainen pääpiikin molekyylipainoon verrattuna, ja se on usein leveä piikki HPLC:ssä, joten se on erityisesti erotettava ja puhdistettava ennen kuin sitä voidaan käyttää kontrollina. Olemme tehneet dimeerien valmistuksen, ja yli 95 %:n puhtauden saavuttaminen kesti useita puhdistuskierroksia.

Linkkeriin{0}} liittyvät epäpuhtaudet
Tilpeptidin rasvahappomodifikaatiossa käytetään linkkeriä (esim. -Glu, PEG jne.), ja tämä linkkeri voi itse tuottaa sivureaktioita synteesin aikana, jolloin syntyy epäpuhtauksia, joissa on puuttuvia tai epätäydellisiä linkkereitä. Tällaista epäpuhtautta ei löydy tavallisista peptideistä, mutta se on ainutlaatuinen tilpeptidille, jota on tutkittava erityisesti.

Deamidoituneet epäpuhtaudet
Asparagiini (Asn) ja glutamiini (Gln) deamidoituvat helposti happamissa tai kuumennusolosuhteissa, mikä johtaa isomeereihin. Tilpeptidin sekvenssissä on useita Asn- ja Gln-yhdisteitä, ja deamidaatioepäpuhtaus esiintyy usein pakotetussa hajoamistestissä, joten epäpuhtauden paikantamiseen on käytettävä kontrollituotetta.

Diastereoisomeerit
Pitkäketjuisen synteesin aikana yksittäiset aminohapot voivat rasemisoitua, mikä johtaa diastereoisomeereihin. Tällaisten epäpuhtauksien pitoisuus ei yleensä ole korkea, mutta asiantuntijat kysyvät ilmoittaessaan, ja on parempi olla kontrollituote vahvistusta varten.

Monia näistä epäpuhtauksista ei voi ostaa, ja ne on syntetisoitava räätälöitynä. Olemme tehneet monia projekteja tilpeptidi-epäpuhtauksien räätälöimiseksi, jotka kattavat kaikki edellä mainitut luokat.

Peptidisarjan deleetio
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 20 is missing, or the amino acid near the fatty acid attachment site is missing. We will synthesize according to your process impurity profile, and the purity is usually >95 % MS- ja NMR-vahvistuksella. Olemme syntetisoineet joukon peptidejä, joissa on 5 aminohapon etäisyys N--päästä C--päähän.

Hapettavat epäpuhtaudet
Met in Tilpeptide is oxidized to sulfoxide or sulfone, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control. The purity is >95 % ja voimme tarjota LC-MS-spektrin hapetusasteen vahvistamiseksi. Sulfoksidi ja sulfoni erotetaan HPLC:llä, ja voimme tehdä molemmat.

Rasvahappoja poistavat tuotteet
Tämä on yksi vaikeimmista epäpuhtauksista työskennellä tilpeptidissä. Rasvahappoketju voi olla kokonaan tai osittain poissa (esim. muutamat viimeiset hiilet puuttuvat). Voimme syntetisoida sarjan muunnelmia ketjun eri asemille. Yhdessä monimutkaisimmista projekteistamme asiakas pyysi meitä syntetisoimaan rasvahappoketjusta puuttuvan epäpuhtauden, jonka rasvahappoketjusta puuttui 8 hiiltä, ​​ja meillä kesti kaksi kuukautta saada se kuntoon.

Dimer
Dimeerit, jotka muodostuvat ristisitoutumisesta- tai ei--kovalenttisista vuorovaikutuksista, voidaan valmistaa eri menetelmillä ja eristää ja puhdistaa korkean puhtauden kontrollin aikaansaamiseksi. Dimeerien puhdistaminen on työlästä, mutta meillä on kokemusta monomeerien erottamisesta.

Linkkeriin{0}} liittyvät epäpuhtaudet
Linkkeri (-Glu, PEG jne.) saattaa puuttua tai olla epätäydellinen, mikä johtaa sarjaan liittyviä epäpuhtauksia. Voimme syntetisoida erilaisia ​​variantteja, joissa on puuttuvia linkkereitä, lyhennettyjä linkkereitä tai yhteensopimattomia linkkereitä, ja auttaa sinua rakentamaan tällaisten epäpuhtauksien spektrit.

Deamidoituneet epäpuhtaudet
Sekvenssin Asn- ja Gln-kohtia varten voimme valmistaa deamidoituja epäpuhtauskontrolleja pakotetulla hajoamisella tai kohdistetulla synteesillä. Ero molekyylipainossa deamidoinnin jälkeen on vain 1, jota ei ole helppo erottaa MS:llä, joten käytämme yleensä NMR:ää tai erityisiä kromatografisia olosuhteita vahvistamaan.

Muut räätälöidyt epäpuhtaudet
Jos löydät tutkimuksestasi uuden tuntemattoman epäpuhtauden, voimme auttaa sinua analysoimaan rakennetta ja syntetisoimaan sen. Lähetä meille näytteet, teemme LC-MS-analyysin, päättelemme rakenteen, sitten suuntasynteesin ja vertaamme sitten retentioaikaa ja massaspektria vahvistaaksemme yhteensopivuuden. Olemme tehneet tämän prosessin monta kertaa ja onnistumisprosentti on melko korkea.

Analyyttisten menetelmien kehittäminen ja validointi
HPLC- tai LC-MS-menetelmää määritettäessä tarvitaan epäpuhtauksien hallinta paikantamista, erotuksen määrittämistä, lineaarisen alueen tarkistamista ja talteenottoa varten. Ilman ohjausta menetelmän validoinnista puuttuu pala. Monet asiakkaat pyytävät meitä suorittamaan ensin muutamia keskeisiä epäpuhtauksia menetelmän määrittämiseksi ja sitten hitaasti korjaamaan loput.

Heterogeeninen massaspektrometria
Kun geneerinen lääke ilmoitetaan, tarvitaan kattava laadullinen ja kvantitatiivinen analyysi prosessin epäpuhtauksista ja hajoamistuotteista. Jokaisen epäpuhtauden sijainti, sisältö ja rakenne on vahvistettava kontrollituotteella. Olemme nähneet ilmoituksen tiedot lähetettiin täyttämään, yhdeksän kertaa kymmenestä on epäpuhtaudet tämä pala ei ymmärtänyt.

Vakaustutkimukset
Pitkän aikavälin stabiilisuus- ja nopeutetuissa testeissä on tarpeen määrittää, mitkä hajoamistuotteet ovat hallitsevia ja mikä on sisällön trendi. Epäpuhtauksien hallinnan avulla voimme tarkasti mitata ja seurata. Eräs asiakas teki tilpeptidivalmisteen stabiiliutta ja havaitsi, että hajoamishuippu kasvoi erittäin nopeasti kiihdytetyissä olosuhteissa, joten analysoimme ja syntetisoimme sen MS:llä rakenteen vahvistamiseksi, ja sitten asiakas oli helpottunut ilmoittamaan siitä.

Erän vapautuksen testaus
Kaupallistamisen jälkeen jokainen API- tai formulaatioerä on testattava kyseisen aineen suhteen. Epäpuhtauksien hallinta on olennainen työkalu vapautumistestauksessa.

Tietoja geneerisistä lääkeilmoituksista
Epäpuhtaustutkimukset ovat keskeinen osa arkistointitietoja. Täydellisten epäpuhtauksien profilointi- ja valvontatietojen toimittaminen vähentää merkittävästi uudelleentarkastelun riskiä.

Tapaus 1: lääkeyhtiö, geneerinen tilpeptidilääkeohjelma
He kehittävät geneeristä versiota tilpeptidistä ja tarvitsevat täydellisen sarjan epäpuhtauksien kontrollia menetelmän validointia varten. Räätälöimme niille 12 epäpuhtautta: 5 puuttuvaa peptidiä, 2 hapettunutta epäpuhtautta, 1 dimeeri, 2 rasvahappoa erittävää tuotetta ja 2 linkkeriin liittyvää epäpuhtautta. Jokaisen niistä on puhtaus yli 95 %, ja niihin liittyy MS- ja NMR-tiedot. Projektin johtaja sanoi: "Tilpeptidin epäpuhtauksia on kaksi kertaa enemmän kuin muissa peptideissä, mutta voit valmistaa ne kaikki, ja tiedot ovat täydellisiä, mikä säästää meiltä paljon työtä." Myöhemmin heidän menetelmänsä validointi saatiin onnistuneesti päätökseen, ja nyt he valmistautuvat ilmoitukseen.

Tapaus 2: CRO-yritys, epäpuhtauksien profilointi
He tekivät laadukkaan tilpeptidin tutkimusprojektin, joka vaati kattavan prosessin epäpuhtauksien analyysin. He lähettivät meille raakapeptidinäytteet, ja suoritimme LC-MS-analyysin, päätelimme useiden tuntemattomien epäpuhtauksien mahdolliset rakenteet, sitten syntetisoimme ne kohdistetulla tavalla, vertailimme retentioaikoja ja massaspektrejä ja vahvistimme neljä uutta epäpuhtautta - kaksi niistä oli linkkeri-sukuisia, ja kaksi niistä oli rasvahappomuunnelmia. Asiakas käytti näitä tietoja epäpuhtausprofiilien tarkentamiseen ja läpäisi asiakkaan hyväksynnän.

Tapaus 3: Stabiliteettitutkimukset, bioteknologiayritys
He tutkivat tilpeptidiformulaation stabiilisuutta ja havaitsivat, että hajoamistuotteen määrä kasvoi nopeasti kiihdytetyissä olosuhteissa, mutta he eivät tienneet, mikä se oli. Analysoimme näytteen LC-MS:llä ja oletimme, että se oli deamidaatioepäpuhtaus tietyssä Asn-kohdassa, ja sitten syntetisoimme sen kohdistetulla tavalla ja vahvistimme sen vertailulla. He perustivat määrityksen käyttämällä tätä kontrollia ja seurasivat tarkasti hajoamistuotteen suuntausta. Myöhemmin raporttia tehdessään asiantuntijat korostivat tätä osaa tiedoista, ja vankan tiedon vuoksi korvausta ei maksettu.

Tilpeptidi on suosittu tuote, mutta epäpuhtaustutkimus on herkkä työ, erityisesti rasvahappokuorintatuotteet ja linkkereihin liittyvät epäpuhtaudet, joita monet valmistajat eivät pysty käsittelemään. Jos teet laadukasta tutkimusta tai geneeristä tilpeptidin kehitystyötä ja tarvitset epäpuhtauksien hallintaa, ota rohkeasti yhteyttä. Olemme tehneet paljon työtä, tiedämme, mitkä ovat vaikeudet, ja tiedämme, miten selviämme niistä.