Pitkä peptidisynteesi (jopa 189 aminohappoa)

Pitkä peptidisynteesi|Pitkäketjuisten peptidien räätälöinti|Vaikea peptidisynteesi|Peptidit yli 50mer|Tiede-peptidi

Tarvitsetko pitkän peptidin, jossa on yli 50 aminohappoa? Tiede-Peptide Long Peptide Synthesis -palvelu kattaa 50–189 aminohappoa segmentoidulla synteesistrategialla, joka ratkaisee hydrofobisen aggregaation ja alhaisen synteesin tehokkuuden jne.. 20 vuoden kokemuksen ja vakaan toimituksen. Tervetuloa ottamaan yhteyttä.

Miksi pitkiä peptidejä on vaikea valmistaa?
Jokainen, joka on tehnyt peptidisynteesiä, tietää, että ongelma syntyy, kun peptidiketju on pitkä: 20 aminohapon sisällä useimmat yritykset voivat tehdä sen. Kun kyse on yli 40 aminohaposta, alamme valita sekvenssin. Kun aminohappoa on 60 tai enemmän, niiden yritysten määrä, jotka voivat ottaa haltuunsa, vähenee puoleen. Mitä tulee yli 100 aminohappoon, niin harvat yritykset uskaltavat tehdä sen.

 

Miksi? Koska Long Peptide Synthesis kohtaa useita sudenkuoppia:

Synteesin tehokkuus laskee: jokainen aminohapon jatke, saanto diskontataan kerran. 30 aminohappopeptidi, jokainen vaihe 99 %:n saanto, lopullinen saanto on edelleen 74 %; 60 aminohappoa, jokainen vaihe on edelleen 99%, lopullinen saanto on vain 55%. Itse asiassa monien vaiheiden tuotto ei voi saavuttaa 99%.
Hydrofobinen aggregaatio: Kun pitkässä peptidissä on paljon hydrofobisia aminohappoja, peptidiketju alkaa "paakkuuntua" hartsiin, eivätkä sen takana olevat aminohapot pääse sisään.

Puhdistuksen vaikeus: pitkien peptidien ja epäpuhtauksien retentioaika on liian lähellä toisiaan puhtaaseen leikkaukseen.
Huono liukoisuus: Kun peptidi saadaan, sitä ei voida liuottaa, joten koetta ei voida tehdä.
Olemme olleet näissä kuopissa ennenkin ja tiedämme kuinka kiertää ne.

1. Pituus: 50-189 aminohappoa

2. Segmentoitu synteesistrategia
Tehokkain tapa käsitellä pitkiä peptidejä on segmentoida ne:
Segmenttien valinta: Leikkaa pitkä peptidi 2-4 segmenttiin, joissa kussakin on 30-60 aminohappoa. Leikkauskohta tulisi sijoittaa kohtaan, jossa synteesivaikeus on alhainen, välttäen esimerkiksi jatkuvaa hydrofobista aluetta.
Fragmenttisynteesi: Jokainen fragmentti syntetisoidaan ja puhdistetaan yksitellen riittävän korkeaan puhtauteen.
Fragmenttien liittäminen: fragmenttien liittäminen yhteen liuoksessa tai hartsilla. Liitosmenetelmä voi olla joko luonnollinen kemiallinen tai entsymaattinen.
Taitto: Jos peptidissä on disulfidisidos, se on laskostettava oikeaan konformaatioon silmukoinnin jälkeen.

3. Puhtaus: Riippuen kokeellisista vaatimuksista

Jokaisen pitkän peptidin mukana on HPLC- ja MS-raportti, mikä tekee puhtaustiedoista läpinäkyviä.

4. Muutokset: pitkät peptidit voivat myös lisätä toimintaa
Fluoresoiva leimaus: FITC, TAMRA, haluavat nähdä, missä pitkä peptidi kulkee.
Biotiini: vedä{0}}alas tai testaa.
Isotooppimerkintä: NMR- tai massaspektrometrian kvantifiointiin.
Fosforylaatio/glykosylaatio: jäljittelee translaation jälkeisiä{0}}muokkauksia.

1. Olemme tehneet tätä 20 vuotta
Pitkä peptidisynteesi ei ole jotain, jota kukaan ei voi tehdä. Vuosien varrella olemme käsitelleet paljon pitkiä peptidejä: transmembraaniproteiinifragmentteja, virusfuusiopeptidejä, amyloidiproteiineja, antimikrobisia peptidejä jne. Meillä on hyvä käsitys siitä, mitkä sekvenssit on helppo aggregoida ja mitkä olosuhteet voivat pelastaa ne. Jos tulet meille Long Peptide Synthesille, sinun ei ainakaan tarvitse astua kuoppaan alusta alkaen.

2. Fraktiosynteesi: ei pelkkä paloiksi leikkaaminen
Segmentointi kuulostaa yksinkertaiselta, mutta missä leikata, kuinka pitkä kukin segmentti on ja miten ne yhdistetään, ovat kaikki tärkeitä. Meillä on useita periaatteita:
Leikkaa hydrofiiliseltä vyöhykkeeltä: Vältä leikkaamasta hydrofobista ydintä, muuten segmentit kerääntyvät itsestään.
Tasapainota fragmenttien pituutta: Älä tee yhdestä segmentistä erityisen vaikeaa tehdä ja muista segmenteistä erityisen helppoa. 3.
Liitäntäpisteen valinta: Luonnolliset kemialliset liitännät vaativat tioesteriä C--liittimessä ja Cys-liitintä N--liittimessä, mikä on suunniteltava etukäteen.

3. Hydrofobiset peptidit: erityinen liuotinjärjestelmä.
Jotkut pitkät peptidit ovat niin hydrofobisia, että niitä ei voida ratkaista tavanomaisilla liuottimilla, joten ne paakkuuntuvat yhteen hartsiin syntetisoitaessa. Meillä on erityinen liuotinjärjestelmä ja lisäaineet pitämään peptidiketju venymässä synteesiprosessin aikana, jotta seuraavat aminohapot pääsevät sisään.

4. Laadunvalvonta: tiedot joka vaiheessa
Pitkien peptidien laadunvalvonta on monimutkaisempaa kuin lyhyiden peptidien:
Välituotteiden laadunvalvonta: Kun olet syntetisoinut jokaisen fragmentin, mittaa ensin puhtaus ja molekyylipaino ja siirry sitten seuraavaan vaiheeseen testin läpäisyn jälkeen.
Liitosprosessin valvonta: Ota näyte yhteysreaktiosta ja mittaa MS nähdäksesi yhteyden tehokkuuden.
Lopputuotteen tarkastus: HPLC puhtauden osalta, MS molekyylipainon osalta, MS/MS sekvenssin oikeellisuuden osalta (valinnainen).
Liukoisuustesti: Anna suositellut liuottimet ja liuotusmenetelmät, jotta et saa peptidejä, jotka eivät liukene.
Pitkän peptidisynteesin avulla tiedot puhuvat puolestaan ​​ja jokainen vaihe on jäljitettävissä.

5. Milligrammista sataan milligrammaan, aina loppuun asti
Milligrammaa seulontavaiheeseen, kymmenen milligrammaa validointivaiheeseen, sata milligrammaa rakennetutkimukseen - voimme kestää kaiken. Sama projekti, sama vastine, ei tarvitse-harmonisoida uudelleen.

• Toimitus: Lyofilisoitu jauhe, sentrifugiputket tai injektiopullot, jotka on suojattu typellä.
• Mukana olevat asiakirjat: COA (HPLC-profiili + MS-profiili), MS/MS (sekvenssin vahvistus valinnainen), synteesiraportti (segmentointi- ja liitosprosessi).
• Valinnaiset testit: peptidipitoisuus, endotoksiini, kosteus, aminohappokoostumus, liukoisuustesti.
• Räätälöity pakkaus: annostelu ja merkintä tarpeidesi mukaan.
• Jokainen Long Peptide Synthesis -tuote{0}}tarkistetaan kahdesti sen varmistamiseksi, että järjestys on oikea ja puhtaus on standardien mukainen, ennen kuin se lähetetään.

Halusitpa sitten 80 aa:n transmembraanipeptidin tai 150 aa:n virusproteiinin, voit puhua meille. Jos pyydät Science{3}}Peptideä tekemään Long Peptide Synthesin, sinun ei ainakaan tarvitse yrittää yksitellen.

Sinun on kerrottava minulle:
Peptidisekvenssi (tai kohdetiedot)
Kuinka paljon (milligrammaa)
puhtausvaatimukset
ei sisällä disulfidisidoksia tai muita modifikaatioita

Milloin haluat sen?

Anna sinulle toteutettavuusarvio ja tarjous 24 tunnin sisällä.