Syklinen peptidisynteesi

Syklinen peptidisynteesi|Mukautetut sykliset peptidit|Nidotut peptidit|Sivuketjun syklisointi|Tiede{0}}peptidi

Meta Kuvaus

Tarvitsetko vaikeita syklisiä peptidejä? Tiede-Peptiden syklinen peptidisynteesipalvelu kattaa ensimmäisen ja viimeisen syklisoinnin, sivuketjujen syklisoinnin, nidotun peptidin, useiden disulfidisidosparien muodostamisen. 20 vuoden kokemuksen monimutkaisista syklisistä peptideistä, vakaan toimituksen. Ota rohkeasti yhteyttä.

Syklinen peptidi: lineaarisen peptidin päivitetty versio

Miksi sykliset peptidit?
Jokainen, joka on työskennellyt peptidien kanssa, tietää, että lineaariset peptidit toimivat hyvin, mutta joskus ne eivät toimi niin hyvin - entsyymit pilkkovat ne lyhyessä ajassa kehoon saapumisesta tai ne eivät sitoudu tarpeeksi tiukasti kohdekohtaan. Lineaaristen peptidien tekeminen silmukoiksi on suorin tapa ratkaista nämä ongelmat.

Syklisilla peptideillä on kiinteämpi konformaatio, ja proteaasit eivät ole helppoja leikata niitä; kun ne yhdistetään kohteeseen, koska rakenne on lukittu, entropiahäviö on pieni ja sidosvoima vahvempi. Monet luonnolliset aktiiviset peptidit ovat luonteeltaan syklisiä, kuten antibakteeriset peptidit ja immunosuppressantit, joille evoluutio on pitkään valinnut suunnan meille.

Syklisen peptidisynteesin vaikeus on kuitenkin todellakin paljon korkeampi kuin lineaaristen peptidien vaikeus. Olemme astuneet näihin kuoppiin ennenkin ja tiedämme, miten ne voidaan kiertää, kuten renkaan muodostumisen alhainen tehokkuus, monet sivureaktiot ja puhdistuksen palauttamisen mahdottomuus.

Mitä voimme tehdä soitolle?

1. Kierto: Riippuen siitä, mitä haluat

Pyöräilyn tyyppi	Miten	Milloin sitä käytetään
Ensimmäinen ja viimeinen rengastus	N-end ja C-end ovat suoraan yhteydessä	Lyhyitä peptidejä käytetään yleisesti jäljittelemällä luonnollisia syklisiä peptidejä
sivu{0}}ketjujen kierto	syklisaatio Lys-, Glu- ja Asp-sivuketjujen kautta	Haluat jättää pään trimmaamiseen tai rengas on isompi
disulfidisidoksen syklisointi	Disulfidisidoksen muodostuminen Cys:n välille	Antimikrobiset peptidit, toksiinipeptidit, eniten luonnossa esiintyviä
Nidotut peptidit	Hiilivetyketju kiinnittää heliksin	Alfa{0}}heliksin stabilointi ja kalvon tunkeutumisen parantaminen
Rikkieetterin syklisointi	Ei--luonnollinen sidos, kestää paremmin entsymaattista hajoamista	Lääkkeeksi valmistaminen vaatii suurta metabolista vakautta

Kohderakenteesta riippuen päätämme, mikä syklisointi on sopivin. Ensimmäinen askel syklisessä peptidisynteesissä on valita oikea syklisointimenetelmä.

2. Disulfidisidokset: tehty yhdestä neljään paria
Yksittäinen disulfidisidospari: rutiinikäyttö, onnistumisprosentti yli 95 %.
Kaksi paria disulfidisidoksia: täytyy hallita pariliitoksen järjestystä, meillä on ortogonaalinen suojastrategia.
Kolme tai useampia paria: Jopa neljä paria, avattu ja sovitettu yksitellen.

3. Pituus: 2-60 aminohappoa syklisoinnin jälkeen
Mitä pidempi syklinen peptidi on, sitä parempi, sitä pidempään syklisointitehokkuus laskee. Pisin koskaan valmistamamme syklinen peptidi on 60 aminohappoa, ja syntetisoimme ensin lineaarisen fragmentin segmenteinä ja sitten syklisoimme sen nestefaasissa.

4. Puhtaus: riippuen koevaiheesta

Puhtausaste	Asianmukaiset skenaariot
Raakaöljy (70-85 %)	Ensimmäinen seulonta, katso onko se aktiivinen ensin, säästä rahaa
Perinteinen puhdas (85-95 %)	Solukokeet yhdistettynä kokeisiin, jotka
Korkea puhtaus (95-98 %)	Eläinkokeet, toiminnallinen validointi
Ultrapure (>98%)	Kiderakenne, NMR

Jokaisen syklisen peptidin mukana on HPLC- ja MS-raportit, ja syklisoinnin tehokkuus, jäännöslineaarinen peptidi ja puhtaus on merkitty selvästi.

5. Sormusta voidaan myös muokata
Fluoresoiva leimaus: FITC, TAMRA, Cy5, haluavat nähdä minne syklinen peptidi menee.
Biotiini: vedä{0}}alas tai testaa.
PEGylaatio: In vivo -puoliintumisajan pidentäminen{0}}.
D--tyypin aminohapot: Paranna vakautta.

Miksi tulla meille syklistä peptidisynteesiä varten?

1. Olemme tehneet tätä työtä 20 vuotta
Syklinen peptidisynteesi ei ole vain lineaarisen peptidin heittämistä reaktiopulloon ja sen sekoittamista. Jos syklisointiolosuhteet ovat hieman huonot, joko tuotto on niin alhainen, että epäilet elämääsi, tai siellä on paljon sivutuotteita, joita ei voida erottaa.

Transmembraanisten peptidien syklisointi, konotoksiini kolmella disulfidisidosparilla, nidotut helikaaliset peptidit - olemme käsitelleet monia vaikeita syklisointipeptidejä vuosien varrella. Meillä on hyvä käsitys siitä, mitkä sekvenssit on helppo polymeroida ja mitkä olosuhteet voivat säästää ne. Jos tulet meille sykliseen peptidisynteesiin, sinun ei ainakaan tarvitse astua kuoppaan alusta alkaen.

2. Syklisointistrategiat: kiinteä faasi tai nestefaasi, valinta on sinun
Kiinteän -faasin syklisointi: suora renkaan muodostus hartsille, sopii lyhyille peptideille ja sivuketjujen syklisoinnille, helppokäyttöinen, sopii suurelle teholle.
Nestefaasisyklisointi: lineaaristen peptidien puhdistus, jota seuraa syklisointi, sopii pitkille peptideille tai kun tarvitaan laimeita olosuhteita polymeroinnin välttämiseksi.
Kaksivaiheinen menetelmä: lineaarisen peptidin kiinteän
Ei ole olemassa yhtä-koko-kaikkiin-sopivaa lähestymistapaa. Valitsemme luotettavimman reitin järjestyksen ja pyöräilytavan perusteella.

3. Disulfidisidoksen sovitus: ei arvailua, ei strategiaa
Vaikein asia useissa disulfidisidospareissa on pariliitosjärjestys. Meillä on ortogonaalinen suojausstrategia, joka voi avata ja yhdistää ne yksitellen varmistaakseen, että disulfidisidokset liittyvät oikeaan paikkaan.

4. Laadunvalvonta: jokainen syklinen peptidi dokumentoidaan
MS: Tarkista ensin, onko molekyylipaino oikea (18 tai enemmän pienempi kuin lineaarinen syklisoinnin jälkeen, riippuen renkaanmuodostusmenetelmästä).
HPLC: tarkastele puhtautta ja katso myös kuinka monta lineaarista peptidiä ei ole silmukassa.
Valinnainen: peptidipitoisuus, endotoksiini, kosteus.
Kun suoritat syklistä peptidisynteesiä, tiedot puhuvat puolestaan, ei valheita.

5. Pienistä suuriin määriin toimittajaa vaihtamatta
Milligrammaa seulontavaiheessa, kymmenen milligrammaa validointivaiheessa, sadasta milligrammasta grammaan prekliinisessä vaiheessa - voimme tehdä kaiken. Sama projekti, sama vastine, ei tarvitse-harmonisoida uudelleen.

Mihin syklisiä peptidejä voidaan käyttää?

Tutkimussuunnat	Yleiset käyttötavat	Pyöräily lähestymistapa
Antimikrobiset peptidit	Parempi stabiilisuus, vähemmän herkkä entsymaattiselle pilkkoutumiselle	disulfidisidoksen syklisaatio, head{0}}to--syklisaatio
Kasvainten vastaiset peptidit	Tehostettu sitoutuminen kohteeseen	nidotut peptidit, sivuketjun syklisointi
immunosuppressio	syklosporiinianalogit	Ensimmäinen ja viimeinen rengastus
soluun{0}}tunkeutuvat peptidit	Parannetaan kykyä päästä soluihin	Nidotut peptidit
toksiinien tutkimus	Konotoksiini, käärmeen myrkkypeptidit	Useita disulfidisidospareja
peptidihormonit	pidennetty{0}}puoliintumisaika	sivu{0}}ketjujen kierto
diagnostiset reagenssit	Rengasanturi, hyvä spesifisyys	voidaan leimata biotiinilla tai fluoresoivilla markkereilla

Toimitus ja laadunvalvonta

Toimitus: Lyofilisoitu jauhe, sentrifugiputket tai injektiopullot, jotka on suojattu typellä.
Mukana olevat asiakirjat: COA (HPLC-profiili + MS-spektri), MS/MS (syklisointikohdan/disulfidisidoksen parin vahvistamiseksi).
Valinnaiset testit: peptidipitoisuus, endotoksiini, kosteus, aminohappokoostumus.
Räätälöity pakkaus: annostelu ja merkintä tarpeidesi mukaan.
Jokainen Cyclic Peptide Synthesis -tuote{0}}tarkistetaan kahdesti oikean syklisoinnin ja puhtauden varmistamiseksi ennen toimitusta.

Kolme tositarinaa

Tapaus 1: Tutkimuslaitoksen antimikrobinen peptidiohjelma

The client wanted a cyclic peptide containing two pairs of disulfide bonds, 28 amino acids, of natural origin. We designed an orthogonal protection strategy, forming the first pair first, then oxidizing to form the second pair. Finally, the purity of the cyclic peptide is >95 %, disulfidisidokset ovat pariutuneet oikein ja aktiivisuus on varmistettu.

Tapaus 2: Monikansallisen lääkeyhtiön niittipeptidiprojekti

The customer wanted a stapled peptide with stabilized α-helix and 22 amino acids. We introduced olefinic amino acids into the solid-phase synthesis and completed the ring closure on the resin. The purity was >90 % ja heliksi oli 40 % korkeampi kuin lineaarisen peptidin, ja peptidi sisällytettiin onnistuneesti eläinkokeisiin.

Tapaus 3: Toksiinitutkimus kansallisessa yliopistossa

Asiakas halusi tehdä kolme paria disulfidisidoksia sisältävän Conotoxinin ja pyysi useita yrityksiä valmistamaan sen. Suunnittelimme suojausstrategian uudelleen, avasimme ja pariliimme disulfidisidokset kolmessa vaiheessa ja vahvistimme oikean pariliitoksen MS/MS:n toimesta. Kun asiakas sai peptidin, ratkaisimme rakenteen ja julkaisimme artikkelin.

Puhutko syklisten peptidien tarpeistasi?

Halusitpa sitten vaikean syklisen peptidin kriittisiin kokeisiin tai haluat syklisoida lineaarisen peptidin lääkettävyyden parantamiseksi, voit puhua meille. Jos etsit Science{1}}peptidiä sykliseen peptidisynteesiin, sinun ei ainakaan tarvitse astua kuoppaan alusta alkaen.

Sinun on kerrottava minulle:

Peptidisekvenssit (tai lineaariset sekvenssit)
Kuinka haluat syklisoida (ensimmäinen ja viimeinen/sivuketju/disulfidisidos/nitottu peptidi)
Kuinka paljon pyytää (mg/g)
puhtausvaatimukset

Milloin haluat sen?

Anna sinulle toteutettavuusarvio ja tarjous 24 tunnin sisällä.